[ 执业兽医资格考试教学大纲 ]

　　一、细胞的形态与大小

　　 (一)细胞的形态 (二)细胞的大小

　　二、细胞的构造与功能

　　(一)细胞膜 (二)细胞质 (三)细胞核

　　三、细胞周期

　　（一）G1期 （二）S期 （三）G2期 （四）M期

　　四、细胞分裂

　　（一）无丝分裂 （二）有丝分裂

　　五、细胞分化

　　六、细胞衰老与死亡

　　[ 文本教案 ]

　　目的要求

　　1． 要求学生掌握细胞的形态和大小

　　2． 掌握细胞膜的“液态镶嵌模型”的结构及功能

　　3． 掌握细胞器的结构和功能

　　重 点

　　液态镶嵌模型，各种细胞器的结构和功能

　　难 点

　　1． 细胞膜的分子结构，即液态镶嵌模型或脂质球蛋白镶嵌模型

　　2． 细胞膜的功能中的扩散作用、主动运输、胞吞作用和胞吐作用

　　课堂组织

　　一．提问

　　1． 组织学、胚胎学、细胞、组织的概念

　　2． 组织胚胎学的研究方法

　　二．结合Powerpoint幻灯片扼要复习上次课内容并加以总结医学，教育|网 搜集整理

　　三．讲新课

　　1． 采用Powerpoint幻灯电化教学，实验课前看电视教学片

　　2． 本章共计6学时，讲授4学时，实验2学时

　　3． 实验课在显微镜室上，详见实验与绘图指导，即另一本教案（实验课用）

　　授课提纲

　　一．细胞的形态与大小

　　二．细胞的构造与功能

　　（一）细胞膜的结构

　　1． 化学成分：蛋白质、酶、脂类、多糖、水、无机离子、微量核酸

　　2． 分子结构：EM下，分出平行三层，内外二层电子致密度高，为磷脂分子，中间层为镶嵌的球蛋白，构成单位膜

　　（1）脂质双分子层

　　（2）球蛋白

　　（3）细胞膜上的糖类（细胞衣、糖衣）

　　（二）细胞膜的功能

　　1． 物质运输

　　（1）扩散作用

　　（2）主动运输

　　（3）胞吞与胞吐

　　2． 构成受体

　　3． 细胞膜抗原

　　4． 保护作用、运动、吸收、分泌、分化

　　（三）细胞质的构造和功能

　　1． 基质（溶质、内含物）：是存在于细胞质内的营养物质和代谢产物。

　　细胞骨架、支架作用，维持细胞形状

　　2． 细胞器

　　（1）线粒体Mitochondria 双层单位膜构成的颗粒状或短棒状结构。

　　功能：进行生物氧化、提供能量

　　（2）核糖体（核蛋白体）（Ribsome）由大小2个亚基构成，分游离核糖体、聚核糖体。功能：合成蛋白质

　　（3）内质网Endoplasmic reticulum

　　① 粗面内质网RER：单位膜构成，有核糖体

　　功能：参与蛋白质合成与运输

　　② 滑面内质网SER：单位膜构成，无核糖体

　　功能：根据细胞类型定，参与糖元、脂肪、固醇、激素合成

　　（4）高尔基复合体Golgi complex， 由扁平囊泡、大泡、小泡构成

　　功能：形成分泌颗粒，合成多糖与脂蛋白

　　（5）溶酶体Lysosome 单位膜包有水解酶

　　功能：消除作用，精子顶体也是溶酶体

　　（6）过氧化物酶体Peroxisome单位膜包氧化酶，过氧化氢酶

　　功能：氧化，产生过氧化氢

　　（7）中心体Centrosome,2个中心粒外包致密物质，参与细胞分裂

　　（8）微丝Microfilament 肌动蛋白构成，MF中起收缩作用，NC、上皮细胞起支持作用

　　微管Microtubule 微管蛋白构成，纤毛、鞭毛、纺锤体中运动，NC中支持与运输

　　教学法

　　多媒体教学

　　课目 细胞学（续第二次课）Cytology

　　目的要求

　　1． 掌握细胞核的结构和机能

　　2． 掌握细胞周期

　　3． 掌握细胞的有丝分裂与无丝分裂

　　4． 了解细胞的分化、衰老和死亡

　　重点

　　细胞核的结构、染色质、染色体、细胞周期、细胞分裂

　　难点

　　1． 染色质（常染色质、异染色质）

　　2． 染色体

　　3． 细胞繁殖周期

　　课堂组织

　　一．提问

　　1． 脂质球蛋白镶嵌模型

　　2． 细胞膜的功能

　　3． 各种细胞器的结构及功能

　　4． 溶酶体的形成与退化过程

　　二．结合Powerpoint幻灯片扼要复习细胞膜与细胞质的内容并加以归纳和总结

　　三．上新课

　　1． 采用Powerpoint幻灯片，多媒体教学

　　2． 讲授2学时，实验2学时

　　3． 实验课在显微镜室上，具体内容等详见实验、绘图指导，即另一本教案

　　授课提纲

　　（四）细胞核Nucleus

　　1． 核膜：薄层单位膜，外面附着蛋白质，内面光滑，膜上有核孔，便于物质交换。

　　2． 核质nucleoplasm ：无定型的胶状物，含各种酶与无机盐。

　　3． 核仁nucleolus：由核糖核酸和核蛋白构成，网状支架，可合成核蛋白。

　　4． 染色质Chromatin：由蛋白质核DNA组成，DNA是遗传物质。

　　常染色质：是指间期核的染色质上和分裂期的染色体上被碱性染料着色较浅的区域。

　　异染色质：是间期核的染色质上和分裂期的染色体上被碱性染料着色较深的区域，属非活动性染色质。

　　染色体Chromosome细胞进入有丝分裂期，染色质高度卷曲和螺旋化，变粗变短，形成一定形态结构和数量的染色体。

　　不同动物染色体的数目不同。哺乳动物有一对性染色体：♀-XX，♂-XY

　　应用与于生产中，精子分离X-Y精子，X精子与卵结合产♀，奶牛产奶；Y精子与卵结合产♂，鹿茸，麝香等。

　　三．细胞周期Cell cycle

　　指细胞从前一次分裂结束时开始到下一次分裂结束所经历的一个完整的细胞世代。

　　（一）分裂间期

　　1． G1期，DNA合成前期

　　2． S期，DNA合成期

　　3． G2期，DNA合成后期

　　（二）分裂期（M期）

　　形成2个子细胞，细胞周期结束

　　四．细胞分裂Cell division

　　（一）有丝分裂Mitosis 又分四期：

　　1． 前期Prophase

　　2． 中期Metaphase

　　3． 后期Anaphase

　　4． 末期Telophase

　　（二）无丝分裂Amitosis（直接分裂）

　　五．细胞分化cell differentiation

　　是在发育进程中，细胞发生化学组成、形态结构和功能彼此互异逐步改变的现象。高等生物细胞分化很显著，基本不可逆转，受遗传物质的调控和环境影响。

　　六．细胞的衰老与死亡

　　教学法

　　多媒体教学

　　[ 教案 ]

　　[ 实验指导 ]

　　实验32 显微镜的构造和使用方法，组织切片的制做程序

　　一、目的要求

　　⑴掌握显微镜的基本结构及使用方法。

　　(2)了解组织切片制做知识，有助于观察切片。

　　二、观察内容

　　1．显微镜的一般构造：分光学部分和机械部分：

　　⑴光学部分

　　目镜?鹤霸诰低采隙耍锩孀坝兄刚耄Ｓ玫奈?10×目镜。

　　物镜：装在转换器上，一般常用的物镜为4×、10×、40×和100×（油浸镜头）。

　　集光器：包括聚光镜和光圈（虹彩）两部分。装于载物台下面。

　　⑵机械部分

　　镜座：为显微镜基部，用以固定镜身。

　　载物台：为放置标本的平台，其中有通光孔，两旁有压片和标本移动器。

　　镜头转换器：位于镜筒之下，可装物镜，为转换不同倍数的物镜用。

　　粗调节轮：旋转时，载物台升降距离较大。

　　微调节轮：旋转一周，可使镜头升或降0.1毫米。

　　镜臂：供握持显微镜用。

　　粗调限位器：拨下限位器使载物台只能使粗调上升至所限位置，可避免因操作不慎而导致高倍镜与标本相碰。

　　2．显微镜的使用方法

　　⑴低倍镜使用法：

　　①将切片标本置于载物台上，使切片内的标本，对准镜台中央小孔，然后用压片夹固定切片。

　　②将10×物镜移至中央（位于光轴上），旋动粗调节轮使物镜与载片相距1厘米左右。

　　③将反光镜（自带光源的显微镜除外）对准光源，集光器调到适当亮度。

　　④以左眼或右眼对准目镜，进行观察。旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，至标本的影象现出为止，拨动粗调限位器限位。

　　⑤旋动细调节轮，使载物台上、下微微移动，直到显出清晰的影象。

　　⑵高倍镜使用方法：

　　①依前法先用低倍镜将焦点调准，使物象清晰。

　　②将欲检标本的某一部分移至低倍镜视野中央。

　　③直接调转高倍物镜，稍将细调节轮上下旋动，至显出清晰的物象为止。

　　⑶油镜的使用方法：

　　①用油镜前，先将集光器上升到顶，虹彩放大，使亮度达到最强度。

　　②将需要详细观察的部分，移到视野中心，用压片夹固定，切勿移动。

　　③将高倍物镜移开，滴加一滴香柏油于切片被检部位。

　　④转换油镜头，使镜头与被检物间充满香柏油，然后转动细调节轮，直至有清晰的物象为止，此时切勿使用粗调节轮，以免压碎切片，损坏镜头。

　　⑤用完油镜后，必须将镜头和切片上的香柏油用擦镜纸擦去，并用沾有乙醚——酒精液（7：3）的擦镜纸擦拭镜头及载片，以免污损镜头。

　　3．使用显微镜注意事项

　　①移动显微镜时一手紧握镜臂，一手平托镜座，使镜身保持直立状态。

　　②凡光学部分不可用手指或其它物品（如毛巾、纸张）擦拭，要用清洁的擦镜纸，必要时加一滴乙醚——酒精液擦拭。

　　③不得随意拆卸显微镜的任何组成部分。

　　④不能用高倍镜检视任何不加盖片的标本，以免污染物镜，显微镜任何部分不应受潮。

　　⑤掉换高倍物镜或油浸镜后，即不能用粗调节轮，只能用细调节轮，以免损坏载片及镜头。

　　⑥使用中发生问题时，请随时报告教师，切勿自行处理。

　　组织切片制作原理和程序：

　　1．取材：要取最新鲜的正常的材料。由于各器官组织坏死变化很快，所以取材要求迅速。取材时要用锋利的刀片或剪刀，勿用镊子对组织加以压迫，以免组织破裂和变形。

　　2．固定：将取下的材料放在固定液中固定24小时，目的是防止腐败、保持原有结构并使组织硬化，便于处理，常用的固定液有10％福尔马林，Bouin液及Zenker液。

　　3．脱水及透明：材料固定后，要经过脱水和透明处理，才能包埋。脱水是除去组织中的水分，透明是一种能使石蜡、火棉胶溶解的溶剂，使组织透明，并使石蜡或火棉胶逐渐导入组织内。

　　4．包埋：材料脱水透明后，即可包埋，包埋可使材料有适当的硬度便于切成薄片，包埋常用石蜡和火棉胶，其中石蜡最常用，需时短，且可制成较薄的切片。

　　火棉胶则用于神经组织、眼球等大块或宜于收缩的材料。

　　5．切片及贴片：切片法有徒手切片、冰冻切片、石蜡切片和火棉胶切片。

　　石腊切片用于轮转式切片机或滑走切片机操作。火棉胶用于滑走切片机操作。

　　石蜡切片用蛋白甘油混合液贴附于玻片上，火棉胶切片，则可直接染色，染色后，封藏于玻片上。

　　6．染色：染色的目的式使细胞中的构造清楚，易于观察。染料的种类繁多，其性质也不同，有酸性、中性、碱性。染色方法有单一法、双重法、三重法。其中双重法以苏木素——伊红染色法最常用。

　　7．封藏：染色后的切片，用中性树胶或合成树胶加盖玻片封藏。

　　实验33 细胞的基本结构

　　一、目的要求：通过观察要求掌握细胞的基本结构。

　　二、准备工作：复习讲课内容和预习实验指导。

　　三、观察内容

　　1．卵细胞：1号切片

　　卵细胞是动物体内的大型细胞，观察其形态结构较为方便。

　　猫、猪或羊的卵巢切片，Bouin氏液固定，石蜡包埋，HE染色。

　　先用低倍镜观察，在靠近卵巢周边处，可见到成群存在（猫）或散在分布（猪、羊）的大型圆形卵细胞，在卵细胞周围还有一层扁平的细胞围绕，共同组成初级卵泡，此时的卵细胞系初级卵母细胞，外周的扁平细胞叫卵泡细胞。

　　选择一个结构清楚的初级卵泡移到视野中央，转换成高倍镜观察，重点观察卵细胞。

　　细胞膜 位于细胞的表面，在固定染色的切片上为一薄膜。

　　细胞质 在本切片中，只能看到细胞质内有红染的小颗粒（卵黄颗粒），其它的细胞器和内含物在制片过程中或被溶剂溶解或未染出。

　　细胞核 呈圆形，位于细胞的中央或稍偏的位置，染成蓝紫色，核膜明显，染色质呈深染的团块或颗粒状，有1-2个核仁。

　　高倍镜下绘图：示卵细胞构造。

　　注解：细胞膜、细胞质、卵黄颗粒、细胞核、核膜与核仁。

　　2．神经细胞：40号切片，4号切片

　　低倍镜下，可见到一些大型带突起的蓝染细胞——脊髓腹角运动神经细胞。这种神经细胞有很多突起，但由于切片关系，只能看到其中的数个突起。胞质内有染色呈深蓝紫色的块状或颗粒状物质，称尼氏体，在电镜下为粗面内质网。胞核着色较淡，多位于细胞中央，内含少量染色质，核膜明显，有一个大而圆的核仁。

　　高倍镜下绘图：示神经细胞的构造。

　　注解：胞体、胞突、胞核、尼氏体、核仁。

　　3．肝细胞：68号切片

　　猪肝，Bouin氏液固定，石蜡切片，HE染色.

　　低倍镜下找到呈多边形的肝小叶，选择一个肝小叶换高倍镜观察，可见到呈索状排列的肝细胞，呈多边形，有1-2个圆形细胞核，核仁明显，核膜清楚，核内染色质稀疏，染色较浅

　　观察细胞器与内含物

　　细胞器与内含物的种类很多，实验课仅观察几种主要的细胞器和内含物在光镜下的形态和位置。各种细胞器和内含物，在一般的HE染色的切片上看不到，须用特殊方法染色显示。

　　线粒体——示教：3号片

　　小狗胰脏，Regaud氏液固定，石蜡切片，铁苏木素染色。

　　线粒体用铁苏木素染色呈黑色，分布于核周围的细胞质中，线粒体在高倍镜下呈粒状、线状或短棒状，或直或曲，轮廓鲜明。

　　胰脏的分泌细胞呈锥形，核大而圆，位于细胞中央，细胞游离端聚集有许多大而圆的黑色颗粒为分泌颗粒。

　　高尔基复合体——示教：2号片

　　狗或猪的脊神经节，Golgi氏亚砷酸硝酸银法镀染。

　　在切片上有大小不一的圆形脊神经节细胞，胞核不着色，但能看到淡黄色的核仁。核周围的细胞质中有镀染成黑色的网状或颗粒状物，即光镜下的高尔基复合体。

　　糖元——示教：6号片

　　猪肝，冷Carnoy氏液固定，PAS反应法显示糖元，苏木素复染胞核。

　　在高倍镜下，肝细胞中可见到大量紫红色的糖元颗粒或小块，在很多肝细胞中，糖元偏于细胞一侧，此系制片过程造成，生活状态时分布较均匀。